Определение активности ферментов в моче может служить важным
критерием степени повреждения почек при различных патологических процессах в
этих органах. Целью настоящего исследования явилось изучение активности
маркерных ферментов повреждения почек (нейтральной a-глюкозидазы и N-ацетил-b-D-гексозаминидазы)
в качестве критерия эффективности комплексного консервативного лечения у 41
больного с закрытой травмой почки 1-2 степени. В комплексное лечение включали
системную энзимотерапию (вобензим) и ГБО. Проведенный анализ полученных
результатов показал, что определение активности маркерных ферментов в моче больных
с закрытой травмой почек подтверждает факт наличия травмы почечной ткани и
четко отражает более высокую эффективность использования в комплексной терапии
препарата системной энзимотерапии – Вобензима и ГБО.

ИЗМЕНЕНИЕ МАРКЕРНЫХ ФЕРМЕНТОВ ПОВРЕЖДЕНИЯ ТКАНЕЙ ПОЧЕК ПРИ КОМПЛЕКСНОМ КОНСЕРВАТИВНОМ ЛЕЧЕНИИ БОЛЬНЫХ С ЗАКРЫТОЙ ТРАВМОЙ ПОЧКИ.

И.А.Гончаренко

Известно, что определение активности ферментов в моче может служить важным критерием степени повреждения почек при различных патологических процессах в этих органах [9,10,12,16,17]. В зависимости от степени повреждения в мочу выделяется ферменты, имеющие различную внутриклеточную локализацию [7,13]. Так, при незначительном и средней степени повреждения почек в моче повышается активность ферментов, связанных со щеточной каймой, цитоплазматические и лизосомальные ферменты [13]. Значительное повышение активности митохондриальных ферментов в моче, как правило, соответствует некрозу клеток, подтверждаемом при морфологическом исследовании почечной ткани [13].

В настоящее время с диагностической целью наиболее часто определяют активность лизосомальных гидролаз N-ацетил-b-D-гексозаминидазы и фермента щеточной каймы эпителиальных клеток извитых канальцев и петли Генле - нейтральной а-глюкозидазы. Эти ферменты, являются маркерами повреждения почек человека при различных патологиях [ 7,9,10,12,13,15], так как в мочу здоровых больных они не могут попасть через базальную мембрану клубочков. Активность этих ферментов в моче больных хорошо изучена при диффузных воспалительных заболеваниях, при кризе отторжения почечного трансплантата, при ряде соматических и онкологических заболеваниях, а также при нефротоксическом воздействии различных токсических веществ [ 9,10,11,13].

Целью настоящего исследования является изучение активности маркерных ферментов повреждения почек в качестве критерия эффективности комплексного консервативного лечения больных с закрытой травмой почки 1-2 степени.

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ.

Нами обследовано 41 больной с закрытой травмой почек 1-2

степени, не осложненных острым пиелонефритом. Возраст больных колебался от 20-69 лет. Среди обследованных больных мужчины составляли 38 человек, женщины-8.

Для диагностики степени повреждения почек применяли клинико-лабораторное, рентгенурологическое, ультразвуковое и радиоизотопное исследование. У 8 больных использовали также компьютерную томографию.

При выборе методов комплексного консервативного лечения исходили из результатов наших предыдущих исследований динамики морфологических изменений в почке экспериментальных животных с дозированной тупой травмой почки [4,6]. При этом учитывались выявленные нами значительные гемодинамические нарушения в сосудах микроциркуляторного русла почки, а также дистрофические процессы в извитых канальцах в ранние сроки после травматического повреждения с последующим нарастанием склеротических процессов и необратимым снижением функции почек.

В связи, с выраженными явлениями ишемии в ранние сроки повреждения почек у 19 больных (2-ая группа) в комплексное лечение включали гипербарическую оксигенацию (ГБО) и системную энзимотерапию[2,3,8,14]. Противоишемическое действие оксигенотерапии, а также предупреждение перехода дистрофических процессов в некробиотические нами подтверждено ранее у экспериментальных животных с дозированной закрытой травмой почек [5].

ГБО проводили начиная со вторых суток после травмы почек в одноместном лечебном бароаппарате БЛКС-3-01. Газовая среда – кислород (О2). Режим проведения сеанса ГБО: давление О2 – 1.5 атм , продолжительность сеанса – 60 мин., экспозиция – 40мин., частота сеанса – один раз в сутки, всего 5 сеансов.

Для улучшения микроциркуляции и ускоренной элиминации измененных и погибших в результате травмы клеток почечной ткани больным 2-й группы также назначали в комплексное лечение полиферментный препарат пролангированного действия – ВОБЕНЗИМ (по 5 драже 3 раза в сутки 30 дней). Высокая эффективность системной энзимотерапии была подтверждена Бориросовым А.В. [1] у больных мочекаменной болезнью при различных методах оперативного удаления камней почек.

У 22 больных с закрытой травмой почек 1-2 степени (1-ая группа) ГБО и системная энзимотерапия вобензимом не проводилась. Эти больные выступали в качестве контрольной группы. Пациентам 1-й группы лечение проводилось традиционными методами. Им, как и больным 2-й группы, с первых же дней после травмы почек проводили курс лечения гемостатиками ( дицинон по 1мл в/м 2 раза в сутки 8 дней), анальгетиками и спазмолитиками ( анальгин 50% - 2.0 в/м 2 раза в сутки – 5 дней + но-шпа 2мл в/м 2 раза в сутки – 5 дней) и антибиотиками ( клафоран 500мг в/м 2 раза в сутки 7 дней или цефтриаксон 1.0г в/м 1 раз в сутки 7 дней).

Комплекс биохимических исследований у больных 1-й и 2-й групп включал изучение в крови и моче активности маркерных ферментов повреждения почек – нейтральной а-глюкозидазы и N-ацетил-D-гексозаминидазы, содержания белка в сыворотке крови и моче, определение рН-мочи в динамике.

Для биохимических исследований использовали сыворотку крови и мочу больных (1 и 2 групп), забор проб у которых осуществляли в сроки: в 1-е сутки после перенесенного повреждения почки (до сеансов ГБО и начала комплексного медикаментозного лечения), на 7-е (после проведения сеансов ГБО), на 14-е и 30-е сутки. Мочу и сыворотку крови использовали непосредственно после получения или хранили в замороженном состоянии (от- 15до-20С) в течении 5-10 дней.

Активность нейтральной А-глюкозидазы определяли, используя в качестве субстрата п-нитрофенил-А-D-глюкопиранозид. Инкубационная смесь состояла из 0,1 мл мочи, разведенной в 10 раз ( или сыворотки крови с разведением в 2 раза) и 0,2 мл 0,2М калий – фосфатного буфера, рН-6,5 , содержащего 1 мм глюкопиранозида. Пробы инкубировали в течение 60 мин. При 37 С. Реакцию останавливали добавлением 5 мл 0,1 М раствора карбоната натрия. Оптическую плотность образовавшегося п-нитрофенола измеряли на электрофотометре Spekol-210 (Германия) при 400 нм. Активность выражали в наномолях распавшегося субстрата в 1с на 1л мочи (сыворотки крови) [ 11].

Активность N-ацетил-В-D-гексозаминидазы определяли, используя в качестве субстрата п-нитрофенил-N-ацетил-В-D-глюкозаминид. Активность N-ацетил-В-D-гексозаминидазы измеряли по скорости образования п-нитрофенола из п-нитрофенил-N-ацетил-В-D-глюкозаминида. Инкубационная смесь состояла из 0,1мл мочи разведенной в 20 раз ( или 0,1мл сыворотки крови с разведением в 2 раза) и 0,1 мл 0,5М цитратно-фосфатного буфера, рН-4,5 , содержащего 7,5мМ п-нитрофенил-N-ацетил-В-D-глюкозаминида. Пробы инкубировали 30 мин. при 37С. Реакцию останавливали добавлением 3 мл 0,1М карбоната натрия. Оптическую плотность образовавшегося п-нитрофенола измеряли на спектрофотометре Spekol-210 (Германия) при 400 нм. Активность выражали в наномолях распавшегося субстрата в 1 с на 1 л мочи (сыворотки крови) [12].

Содержание белка определяли по общеизвестному методу Лоури. рН-мочи определяли с помощью рН- метра. Статистическую обработку данных проводили методом вариационной статистики, с использованием критерия t-Стюдента.

РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЯ.

Сравнительная оценка характера протекания посттравматического периода у больных 1 и 2 групп позволила отметить, что при введении в комплексную терапию ГБО и системную энзимотерапию вобензимом уже в раннем периоде после перенесенного повреждения почки отмечалось значительное улучшение самочувствия и отсутствие болевых ощущений в поясничной области на стороне поражения, а также не наблюдалось каких-либо побочных эффектов.

Исследования проводились в динамике у больных обеих групп. Результаты проведенных нами биохимических исследований показали, что у здоровых людей активность нейтральной А-глюкозидазы в крови составляла-3,09+-0,311 нмоль/с*л(n=18), в моче-7,72+-0,738 нмоль/с*л, а активность N-ацетил-В-D-гексозаминидазы в крови составила-306,85+-27,01 нмоль/с*л (n=18), в моче 25,56+-2,92 нмоль/с*л.

Результаты исследования активности ферментов у больных с закрытой травмой почек 1-2 степени представлены в таблице №1 и №2.

Активность нейтральной А-глюкозидазы в сыворотке крови и моче больных с повреждением почек 1-2 степени при разных видах лечения (нмоль/с*л)

Таблица 1

Из приведенных в табл. (1 и 2) данных видно, что в сыворотке крови активность нейтральной А-глюкозидазы и N-ацетил-В-D-гексозаминидазы статистически достоверно не менялось на протяжении всего срока лечения, как в контрольной группе, так и в группе больных, в комплекс лечения которых включали ГБО-терапию и системную энзимотерапию. Таким образом, активность исследуемых ферментов в крови не может служить в качестве диагностического критерия эффективности лечения больных с закрытой травмой почек 1-2 степени.

Существенно иная картина активности нейтральной А- глюкозидазы и N-ацетил-В-D-гексозаминидазы наблюдалось в моче . Так, у пациентов с повреждением почек (1 группа) в процессе лечения с использованием традиционного методов, активность N-ацетил-в-D-гексозаминидазы имела тенденцию к нормализации к 30 суткам наблюдения, что составило 79,1% (р<0,05) в сравнении с исходными данными. При применении ГБО и системной энзимотерапии активность N-ацетил-в-D-гексозаминидазы начинает статистически достоверно снижаться уже на 7-е сутки (72,6% р<0,05) от начала лечения и продолжает резко уменьшаться к 30 суткам (49,0% р<0,001). Эта же тенденция сохраняется при изучении активности нейтральной А-глюкозидазы в моче больных с закрытой травмой почек 1-2 степени.

Нами также установлена прямая взаимосвязь между нормализацией активности изучаемых ферментов и восстановлении секреторной функции почек по результатам изучения в динамике изотопной ренографии . Этот факт также подтверждался субъективной оценкой больных, результатами лабораторных исследований осадка мочи, рh мочи, содержания в моче белка и показателями УЗИ.

Таким образом, определение активности нейтральной а-глюкозидазы и N-ацетил-b-D-гексозаминидазы в моче больных с закрытой травмой почек подтверждает факт наличия травмы почечной ткани и четко отражает более высокую эффективность использования в комплексной терапии гипербарической оксигенации и препарата системной энзимотерапии - ВОБЕНЗИМА.

Исследование в моче больных с закрытой травмой почек нейтральной глюкозидазы и N-ацетил-b-D-гексозаминидазы может служить в качестве критерия эффективности проводимой патогенетической терапии, направленной на предупреждение посттравматических осложнений и восстановления функции почек.

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ.

1. style='font:7.0pt "Times New Roman"'>     Борисов О.
В. Комплексна метафiлактика рецидивiв каменеутворення при дистанцiйнiй
лiтотрипсii у хворих сечокам’яною хворобою iз супутнiм пiелонефритом //
Медицинская реабилитация, курортология и физиотерапия. –2001. - №1. – С. 28-30.

2. style='font:7.0pt "Times New Roman"'>     Вальд М.,
Гонзикова М., Масиновский З., Ноуза К., Олеар Т. Системная энзимотерапия в
урологии и нефрологии.// Практическое руководство для врачей. - С.-П.,1999.
–59с.

3. style='font:7.0pt "Times New Roman"'>     Системная
энзимотерапия. Теоретические основы, опыт клинического применения / Под ред.
К.Н.Веремеенко, В.Н.Коваленко. – К.:МОРИОН, 2000. – 320с.

4. style='font:7.0pt "Times New Roman"'>     Патент
№32235А, Украiна. Спосiб моделювання закритоi травми нирки // Гончаренко I.А.,
Борисов О.В., Ухаль М.I.

5. style='font:7.0pt "Times New Roman"'>     Гончаренко
И.А., Борисов А.В., Костев Ф.И., Ухаль М.И. Морфофункциональные особенности
влияния гипербарической оксигенации при экспериментальной закрытой травме почки
у крыс // Медична реабiлiтацiя, курортологiя, фiзiотерапiя. – 2000. -№2. –
С.30-32.

6. style='font:7.0pt "Times New Roman"'>     Гончаренко
I.А., Костев Ф.I., Ухаль М.I., Борисов О.В.,

7. style='font:7.0pt "Times New Roman"'>     Даниленко
А.I. Патоморфологiчнi аспекти закритоi травми нирки в експериментi // Одеський
медичний журнал. –2000. -№5 – С.26-28.

8. style='font:7.0pt "Times New Roman"'>     Делекторская
Л.Н., Ертанов И.Д., Окунев Д.Ю. Ферменты в моче: диагностические и методические
аспекты (обзор литературы)// Лабораторное дело. – 1988. -№9. – С.3-8.

9. style='font:7.0pt "Times New Roman"'>     Руководство
по гипербарической оксигенации / Под ред. С.Н.Ефуни. – М.:”Медицина”, 1986. –
416с., ил.

10. style='font:7.0pt "Times New Roman"'> Лавренова Т.П. Ферменты мочи и их
значение для диагностики поражения почек (обзор литературы) // Лабораторное
дело. – 1990. -№7. – С.4-10.

11. style='font:7.0pt "Times New Roman"'> Лавренова Т.П., Лукомская И.С.
Полиморфизм нейтральной a-глюкозидазы мочи человека // Вопросы мед. химии. – 1983.
-№4. – С.91-94.

12. style='font:7.0pt "Times New Roman"'> Лавренова Т.П. Определение
активности ферментов мочи при поражениях почек // Лабораторное дело. – 1986. -
№7. – С.430-432.

13. style='font:7.0pt "Times New Roman"'> Лукомская И.С., Лавренова Т.П.,
Томилина Н.А., Зубкин М.Л., Фёдорова Н.Д. Диагностическое значение определения
активности нейтральной а-глюкозидазы и N-ацетил-в-D-гексозаминидазы в моче при
патологии почек // Вопросы мед. химии. – 1986. – Т.32, №5. – С.112-119.

14. style='font:7.0pt "Times New Roman"'> Намазова О.С. Исследование
ферментов мочи в диагностике поражений почек // Педиатрия. – 1996. - №3. –
С.83-86.

15. style='font:7.0pt "Times New Roman"'> Гiпербароокситерапiя / За ред.
П.М.Чуева. – Одеса: Одес. держ. мед. ун-т,1999. – 187с. – (Б-ка студента-
медика).

16. style='font:7.0pt "Times New Roman"'> Alhadeff J.A.,
Pollack B.C., Hopfer R.L. et al. // Pediator. Res. – 1985. –Vol.19,№2. –
P.171-174.

17. style='font:7.0pt "Times New Roman"'> Cuxart A.,
Vilardell M., Garcia Bragado F.// Med. clin.- 1981. – Vol.77.-P.175-177.

18. style='font:7.0pt "Times New Roman"'> Janetschek S.,
Frauscher F.,Knapp R.et al.// J.Urol. – 1997.-Vol. 158, №2. – P.346-351.

Дата публикации: 2004-07-27 (3034 Прочитано)